實(shí)驗(yàn)原理

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是簡(jiǎn)捷測(cè)定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法，在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其它硬物在細(xì)胞生長(zhǎng)的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時(shí)間是一種簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的方法，實(shí)驗(yàn)成本低，可以用來檢測(cè)貼壁生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。

Transwell的基本原理是將transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱為上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱為下室，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔，上室內(nèi)添加上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)添加下層培養(yǎng)液。將細(xì)胞種在上室內(nèi)，由于膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)等的影響。

實(shí)驗(yàn)流程

劃痕實(shí)驗(yàn)

1. 用marker筆在6孔板背后均勻得劃?rùn)M線；

2. 在孔中加入細(xì)胞；

3. 第二天用槍頭垂至于背后的橫線劃痕；

4. 用PBS洗去處劃下的細(xì)胞，培養(yǎng)不同時(shí)間，取樣，拍照；

5. 數(shù)據(jù)處理：每個(gè)時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞整體遷移距離=每個(gè)時(shí)間點(diǎn)距離長(zhǎng)度-0時(shí)距離；

6. 結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析。

Transwell實(shí)驗(yàn)

1. 采用未鋪 Matrigel 膠的 Transwell 小室用于實(shí)驗(yàn)；

2. 制備細(xì)胞懸液；

3. 接種細(xì)胞；

4. 檢測(cè)穿過的細(xì)胞數(shù)；

5. 結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析。

客戶提供

細(xì)胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細(xì)胞)，所需藥品，藥物處理方式和濃度。

公司提供

基本實(shí)驗(yàn)步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果、剩余藥品。

實(shí)驗(yàn)周期：大約2-3周左右，具體需要根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定。